جداسازی پروتئین ها به روش کروماتوگرافی

کارشناس آزمایشگاه : سرکار خانم موسوی


مواد و وسایل مورد نیاز : کاغذ صافی ، آمینو اسید مجهول + آمینو اسید های حل شده در آب ، پارافین ، بشر ، حلال (15cc بوتانول + 3cc استیک اسید + 5cc آب) + معرف رنگ(نین هیدرین 0.2% + استون) + سمپلر


 

برای تشخیص نمونه مجهول پروتئینی از کروماتوگرافی استفاده می کنیم .

هر آمینو اسیدی در حلال های مختلف سرعت حرکت متفاوتی دارد بر اساس این سرعت حرکت و فاصله ی حرکت برای هر آمینو اسید در هر حلال یک میزان Rf مشخص می کنند .

Rf یعنی فاصله لکه از مبدا حرکت تقسیم بر فاصله خطی طی شده توسط حلال روی کاغذ .

کروماتوگرافی بر اساس قسمت متحرک می تواند در صورت انجام پذیرد : فاز جامد مایع / جامد گاز / جامد جامد

کروماتوگرافی بر اساس دو فاز صورت می گیرد :

1. فاز ثابت (جامد) : مثل آب + کاغذ صافی

2. فاز متحرک : حلال

http://s3.picofile.com/file/8200467526/url.jpg

 

نحوه کار در ادامه مطلب

تهیه و تنظیم گزارش کار : زهرا آذردار

کپی برداری با ذکر منبع مجاز است !

ادامه نوشته

اندازه گیری کیفی پروتئین ها

کارشناس آزمایشگاه : سرکار خانم موسوی


مواد و وسایل مورد نیاز :

نمونه مجهول از نظر وجود پروتئین - محلول نین هیدرین - لوله آزمایش - سود - H2SO4 -نیتریک اسید


 

برای تشخیص اینکه در یک نمونه پروتئین وجود دارد یا نه از دو واکنش نین هیدرین و گزانتو پروتئیک استفاده می شود .

آزمایش نین هیدرین :

http://s5.picofile.com/file/8128827600/1304880028_200px_ninhydrin_2d_skeletal.png

گزارش کار کامل در ادامه مطلب

تهیه و تنظیم گزارش : زهرا آذردار

کپی برداری با ذکر منبع مجاز است !

ادامه نوشته

اندازه گیری کمی پروتئین ها

کارشناس آزمایشگاه : سرکار خانم موسوی


 

در مورادی پزشک معالج درخواست آزمایش آلبومین و توتال پروتئین را می دهد . این آزمایشها از لحاظ زیر حائز اهمیت هستند .

Albuminعمده ترین pr موجود در پلاسمای خون است و نقش اصلی را در فشار اسمزی ایجاد می کند . اگر میزان آلبومین بالا باشد ایجاد فشار اسمزی نامتعادل در بدن می نماید . 

 Total protein کل پروتئین های بدن که از  نوع گاماگلوبولین ها هستند . که اگر میزاان آن بالا باشد باعث بیماری خود ایمنی می گردد . 

عموما نسبت آلبومین به توتال پروتئین 4 به 6 است ....

نحوه اندازه گیری کمی پروتئین در ادامه مطلب ...

تهییه و تنظیم گزارش کار : زهرا آذردار

کپی برداری با ذکر منبع مجاز است !

ادامه نوشته

بررسی میزان کلسترول و قند خون

کارشناس آزمایشگاه : سرکار خانم موسوی

موضوع :بررسی میزان کلسترول و قند خون


 

مواد و وسایل مورد نیاز :

لوله آزمایش ، نمونه پلاسما ، محلول کار گلوکز و کلسترول ؛ نمونه استاندارد گلوکز و کلسترول ، سمپلر ، اسپکتروفتومتر ، آب مقطر ...

 

http://s5.picofile.com/file/8122819318/Low_white_blood_cell_count.jpg

برای کیت گلوکز و کلسترول جدول به صورت زیر می باشد :

کیت کلوکز و کلسترول
  B T st
نمونه - 20 -
استاندارد - - 20
آب مقطر 20 - -
محلول کار 2000 2000 2000

انکوباسیون 15min در 37c

قرائت 546nm

 

 

برای محاسبه از فرمول های زیر استفاده می نماییم :

http://s6.picofile.com/file/8200497642/%D8%BA%D9%84%D8%B8%D8%AA.jpg

 

میزان نرمال گلوکز باید 70 الی 110 باشد .

میزان نرمال کلسترول زیر 200


 

گزارش کار کامل در ادامه مطلب ...

تهیه و تنظیم گزارش کار : زهرا آذردار

کپی با ذکر منبع مجازاست !

ادامه نوشته

انواع انکوباتور و انکوباتور آزمایشگاهی

http://s3.picofile.com/file/8200702742/%D8%A7%D9%86%DA%A9%D9%88%D8%A8%D8%A7%D8%AA%D9%88%D8%B1.jpg

انکوباتورهای آزمایشگاهی دستگاه هایی هستند که دما، رطوبت و دیگر شرایط محیطی را برای نگهداری و کشت نمونه های آزمایشگاهی کنترل می کنند. این انکوباتورها محفظه‌های بسته و ایزوله‌ای هستند که تا حد امکان از لحاظ دما و ورود و خروج گازها از بیرون آن جدا شده اند، انکوباتورها هیتر قابل تنظیمی دارند که می‌توانند از طریق المنت هایی دمای آن را به ۶۰ تا ۱۰۰ درجه سانتی گراد نیز بالا ببرند. با استفاده از سنسورهایی دمایی، دمای داخل انکوباتور سنجیده شده و سیستم کنترل دمای موجود در آن از طریق ترموکوپل‌های معمولی یا سیستم های مبتنی بر میکرو کنترلرها و plc، دمای داخل آن را در حد تعیین شده ثابت نگه می‌دارد.

اطلاع از انواع انکوباتور ها در ادامه  مطلب ...

ادامه نوشته

سمپلر (میکروپییت) و نحوه کار با آن

http://s5.picofile.com/file/8122472068/55.jpg

 

سمپلر برای برداشتن مقادیر میکرولیتری از مایعات و محلول ها در آزمایشگاه کاربرد فراوان دارد .

توضیح خانم موسوی (کارشناس آزمایشگاه بیوشیمی علوم پزشکی کرج ) در استفاده از سمپلر :برای کاهش خطا در استفاده از این وسیله در آزمایشگاه باید نحوه سمپلینگ صحیح باشد . برای برداشت نمونه باید سر سمپلر راقبل از وارد کردن به مایع تا توقف اول فشار داد و بعد سمپلر را به صورت عمود در داخل محلول فرو برد و سپس سر سمپلر را به آرامی رها می کنیم تا حبابی وارد سر سمپلر نگردد . برای تخلیه سر سمپلر را به دیواره ظرف نزدیک کرده و تا توقف دوم فشار می دهیم تا کاملا تخلیه گردد .

نکات استفاده از سمپلر در ادامه مطلب ...

http://s3.picofile.com/file/8200699334/Transferpette_S2.jpg

 

ادامه نوشته